直读光谱仪的原理和操作方法,你理解对了吗?
发布日期: 2021-04-27 10:42:17
直读光谱仪,是将成分复杂的光,分解成光谱线的科学仪器。直读光谱仪测量范围一般包括波长范围为380~780nm的可见光区和波长范围为200~380nm的紫外光区。因为不同的光源有独特的发射光谱,所以可以使用不同的发光体作为仪器的光源。钨灯的发射光谱:钨灯射的380~780nm波长的光谱通过三角镜折射后,可以得到由红、橙、黄、绿、蓝、蓝、靛蓝构成的连续光谱,该光谱可以作为可见光度计的光源。
由仪器构成。
分光光度计已成为现代分子生物实验室的常规设备。常用于核酸、蛋白质定量和细菌生长浓度定量。
仪器主要由光源、单色器、样板房、检测器、信号处理器和显示器和存储系统组成。
原理::原理:
分光光度计采用可产生多个波长的光源,通过系列分光装置,产生特定波长的光源,通过测试的样品后,部分光被吸收,计算样品的吸光值,转化为样品的浓度。样品的吸光值与样品浓度成正比。
单色光辐射通过测量物质溶液时,被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度(光路长度)成正比,其关系如下
A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc。
式中:a是吸光度
I0是入射的单色光强度
I是透射的单色光强度
t是物质的透射率
k是摩尔的吸收系数
l是分析物质的光程,即比色盘的边长
c是物质的浓度
物质对光的选择性吸收波长和相应的吸收系数是物质的物理常数。知道某纯物在一定条件下的吸收系数后,可以在同一条件下将该试验品配合成溶液,测定其吸收度,上式计算试验品中该物质的含量。在可见光区,除了某些物质吸收光之外,很多物质本身没有吸收,但是在一定的条件下加入显色试剂,或者经过处理后再显色,也称为比色分析。显色时影响显色深度的因素很多,单色光纯度差的设备经常使用,测定时使用标准品和对照品同时操作。
操作方法:
1.接通电源,打开仪器开关,打开样品室的暗箱盖,预热10分钟。
2.将灵敏度开关调整为1文件(零点调节器不调整为0时,必须选择高级文件。中所述情节,对概念设计中的量体体积进行分析
3.根据需要的波长旋转波长选择按钮。
4.将空白液和测定液分别倒入比色杯的3/4处,用镜纸擦拭外壁,放入样品室内,使空白管对准光路。
5.在暗箱盖打开的状态下调节零点调节器,使读数盘指针指向t=0处。
6.盖上暗箱盖,调节100调节器,使空白管t=100,指针稳定后逐步拉出样品滑杆,分别读出测管的光密度值,并记录下来。
7.比色完成,关闭电源,取出比色盘清洗,样板房用软布或软纸擦拭。